Portal Labnews.pl korzysta z Javascript. Włącz go w swojej przeglądarce, aby w pełni cieszyć się portalem. Nie wiesz jak? Kliknij tutaj.

Profilowanie ekspresji genów metodą qPCR

Data rozpoczęcia	2017-03-10
Data zakończenia	2017-03-11
Organizator	MBS - Szkolenia, Konferencje, Usługi Sp. z o.o.
Miejsce	Warszawa
Branże	Farmacja, Biotechnologia, Kosmetologia
Email rekrutacji	mbs@mbs.biz.pl
Dodaj do kalendarza

Profilowanie ekspresji genów metodą qPCR

Real-time PCR, czyli PCR w czasie rzeczywistym, zwany również ilościowym PCR (qPCR), stanowi modyfikację klasycznej reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Modyfikacja ta, przy zastosowaniu odpowiednich barwników i sond oraz odpowiedniej aparatury, umożliwia monitorowanie przyrostu produktu w każdym kolejnym cyklu trwania reakcji. Technika znalazła szerokie zastosowanie m.in. w badaniach naukowych, diagnostyce medycznej, kryminalistyce, przemyśle spożywczym itd.. Rozwój aparatury umożliwiającej jednoczesną analizę 384, 1536, 5184 próbek pozwala stwierdzić, że metoda ta należy do wysokoprzepustowych i może być z powodzeniem stosowana do profilowania ekspresji genów.

Uczestnicy kursu zapoznają się z przebiegiem qPCR, kluczowymi parametrami wpływającymi na wynik reakcji, sposobami optymalizacji reakcji, doborem właściwych genów referencyjnych oraz analizą wyników nie tylko metodami standardowymi (podwójnej delty, Pfaffla) ale również zgodnej z wymaganiami MIQE (Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiment) normalizacją ekspresji genów do średniej geometrycznej z kilku genów referencyjnych. Wszystkie ćwiczenia uczestnicy wykonują w parach.

Zarówno podczas kursu jak również po kursie uczestnicy mogą konsultować swoje problemy z zakresu prowadzenia doświadczeń i analizy wyników qPCR. Mamy nadzieję, że tegoroczny kurs będzie okazją do pogłębienia teoretycznej i praktycznej wiedzy z dziedziny qPCR oraz stworzy możliwość kontaktu osób z różnych środowisk naukowych.

PROGRAM KURSU

1 dzień
09:00 – 09:10	Otwarcie kursu
09:10 – 09:20	Wprowadzenie do kursu
09:20 – 10:20	Metody do profilowania ekspresji genów – wykład I
10:20 – 10:50	Wydzielenie całkowitego RNA – ćw. 1
10:50 – 11:20	Sprawdzenie jakości wydzielonego RNA – ćw. 2
11:20 – 11:50	Oczyszczenie RNA od śladów DNA – ćw. 3
11:50 – 12:10	Synteza cDNA – ćw. 4
12:10 – 12:30	Przerwa
12:30 – 13:30	Ilościowy PCR (qPCR) – wykład 2
13:30 – 13:45	Przygotowanie wzorca – ćw. III Cz. 1. Nastawienie reakcji PCR
13:45 – 14:45	qPCR – warunki reakcji i wzorce: optymalizacja – wykład 3
14:45 – 15:15	Przerwa
15:15 – 15:45	Przygotowanie wzorca – ćw. III Cz. 2. Oczyszczenie produktów reakcji PCR
15:45 – 16:00	Przygotowanie wzorca – ćw. III Cz. 3. Pomiar ilości produktów reakcji PCR
2 dzień
09:00 – 09:20	Analiza ekspresji genów (metoda bezwzględna) – ćw. IV
09:20 – 09:40	Porównanie ekspresji genów referencyjnych – ćw. V
09:40 – 10:40	qPCR – analiza wyników – wykład 4
10:40 – 11:00	Przerwa
11:00 – 12:00	Krzywe topnienia i High Resolution Melting PCR – wykład 5
12:00 – 12:15	Omówienie wyników doświadczenia 4
12:15 – 12:30	Określenie względnego tempa ekspresji genów (metoda podwójnej delty, metoda Pfaffa) – ćw. VI
12:30 – 13:30	Aparatura i odczynniki do qPCR – wykład 5
13:30 – 14:30	Od planowania doświadczenia do publikacji zgodnie z wymogami MIQE - Minimum Information for Publication of Quantitative Real Time PCR Experiment) – wykład 6
14:30 – 15:00	Omówienie wyników doświadczeń

Prowadzący: Dr hab. Tadeusz Malewski,

Termin: 10 – 11 marca 2017 roku

Miejsce: Muzeum i Instytut Zoologii PAN, ul. Wilcza 64 Warszawa

Karty Zgłoszenia oraz opłaty należy przesyłać do dnia 3 marca 2017 r.

Ponieważ ilość miejsc jest ograniczona organizatorzy zastrzegają sobie prawo do wcześniejszego zamknięcia listy w przypadku wyczerpania wolnych miejsc.

Dodatkowych informacji udziela:

Dr Arleta Malewska: mbs@mbs.biz.pl, Tel (22) 668 24 83; 607 929 471

Opłata za udział w kursie wynosi 1200 zł netto + 23% VAT.

Zamawiający zwolniony z podatku VAT proszony jest o dostarczenie drogą elektroniczną (e-mail: mbs@mbs.biz.pl) stosownego oświadczenia

Opłata obejmuje: